正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。 他们合力与恶势力展开斗争……
演员：瑞恩·高斯林 桑德拉·惠勒 詹姆斯·奥尔蒂斯 莱昂内尔·博伊斯 梁振邦 米拉娜·薇恩翠 普里亚·坎萨 利兹·金斯曼 马拉基·卡比 梅丽尔·斯特里普 尤妮斯·胡特哈特 雷·波特 达米安·德·弗罗贝维尔 安妮勒·奥拉莱 米娅·索特里乌 巴斯蒂安·安东尼奥·富恩特斯 爱丽丝·布里塔因 玛雅·伊娃·侯赛因 迈克尔·阿金绥尔 特拉维斯·杰 杰弗里·兰布 保罗·兰伯特 奥赖恩·李 亚伦·尼尔 米歇尔·格里尼奇 伯恩哈德·舒茨
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